Syfilisanalyse, hvordan det sker

I Lab4U-online-lab, ønsker vi, at hver af jer skal passe på dit helbred. For at gøre dette snakker vi enkelt og tydeligt om kroppens indikatorer.

I Lab4U-onlinelaboratoriet udføres serologiske undersøgelser for at påvise patogenantigener og specifikke antistoffer mod dem - dette er den mest nøjagtige metode til diagnosticering af infektionssygdomme. "Hvorfor skal vi tage en antistofprøve for at diagnosticere infektioner?" Et sådant spørgsmål kan opstå, når lægen er henvist til laboratoriet. Lad os prøve at besvare det.

Hvad er antistoffer? Og hvordan man dechiffrer analyseresultaterne?

Antistoffer er proteiner, som immunsystemet producerer som respons på infektion. Ved laboratoriediagnostik er det antistoffer, der tjener som en markør for infektion. Den generelle regel for at forberede en antistofprøve er at donere blod fra en blodåre på tom mave (mindst fire timer skal gå efter at have spist). I et moderne laboratorium testes blodserum på en automatisk analysator ved hjælp af passende reagenser. Serumantistofprøvning er undertiden den eneste måde at diagnosticere infektionssygdomme på..

Test for infektioner kan være kvalitativ (give et svar, hvis der er en infektion i blodet) og kvantitativ (vis niveauet af antistoffer i blodet). Antistoffehastigheden for hver infektion er forskellig (for nogle bør de slet ikke være). Referenceværdier (normale værdier) af antistoffer kan opnås med resultatet af analysen.
I Lab4U-onlinelaboratoriet kan du tage et kompleks af test for alle TORCH-infektioner ad gangen og med 50% rabat!

Forskellige klasser af antistoffer IgG, IgM, IgA

Enzymbundet immunosorbentassay bestemmer antistoffer mod infektioner, der hører til forskellige klasser af Ig (G, A, M). Antistoffer mod virussen i nærvær af infektion detekteres på et meget tidligt stadium, hvilket giver effektiv diagnose og kontrol af sygdomsforløbet. De mest almindelige metoder til diagnosticering af infektioner er test for antistoffer i IgM-klassen (akut fase af infektionsforløbet) og antistoffer i IgG-klassen (resistent mod infektion). Disse antistoffer er til de fleste infektioner..

En af de mest almindelige tests - hospitalsscreening (test for HIV, syfilis og hepatitis B og C) adskiller imidlertid ikke typen af ​​antistoffer, da tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod virusserne af disse infektioner automatisk antyder et kronisk sygdomsforløb og er en kontraindikation, for eksempel til alvorlige kirurgiske indgreb. Derfor er det vigtigt at tilbagevise eller bekræfte diagnosen..

En detaljeret diagnose af typen og mængden af ​​antistoffer i den diagnosticerede sygdom kan foretages ved at bestå en analyse for hver specifik infektion og type antistof. Primær infektion detekteres, når et diagnostisk signifikant niveau af IgM-antistoffer påvises i en blodprøve eller en signifikant stigning i antallet af IgA- eller IgG-antistoffer i parrede sera taget med intervaller på 1-4 uger.

Reinfektion eller reinfektion detekteres ved en hurtig stigning i niveauet af IgA- eller IgG-antistoffer. IgA-antistoffer har en højere koncentration hos ældre patienter og diagnosticerer nuværende infektion hos voksne mere præcist.

En overført infektion i blodet defineres som forhøjede IgG-antistoffer uden en stigning i deres koncentration i parrede prøver taget i intervaller på 2 uger. Der er ingen antistoffer fra IgM- og A-klasser.

IgM-antistoffer

Deres koncentration stiger kort efter sygdommen. IgM-antistoffer påvises allerede 5 dage efter dets begyndelse og toppunkt i intervallet fra en til fire uger, og falder derefter til diagnostisk ubetydelige niveauer inden for et par måneder, selv uden behandling. For en komplet diagnose er det imidlertid ikke nok til kun at bestemme klasse M-antistoffer: fraværet af denne klasse af antistoffer betyder ikke fraværet af en sygdom. Der er ingen akut form for sygdommen, men kan være kronisk.

IgM-antistoffer er af stor betydning i diagnosticering af hepatitis A og infektioner i børn (røde hunde, kighoste, skoldkopper), der let overføres med luftbårne dråber, da det er vigtigt at identificere sygdommen og isolere patienten så tidligt som muligt.

IgG-antistoffer

IgG-antistoffers vigtigste rolle er den langsigtede beskyttelse af kroppen mod de fleste bakterier og vira - selvom deres produktion er langsommere, forbliver responsen på en antigen stimulus mere stabil end hos IgM-antistoffer.

IgG-antistofniveauer stiger langsommere (15-20 dage efter sygdommens begyndelse) end IgM, men forbliver forhøjede længere, derfor kan de vise en langvarig infektion i fravær af IgM AT. IgG kan være lavt i mange år, men når det udsættes for det samme antigen igen, stiger IgG-antistofniveauer hurtigt.

For et komplet diagnostisk billede er det nødvendigt at bestemme IgA- og IgG-antistoffer samtidig. Hvis IgA-resultatet ikke er klart, foretages bekræftelse ved IgM-bestemmelse. I tilfælde af et positivt resultat og for nøjagtig diagnose, bør den anden analyse, der blev foretaget 8-14 dage efter den første, kontrolleres parallelt for at bestemme stigningen i IgG-koncentration. Resultaterne af analysen skal fortolkes sammen med de oplysninger, der er opnået ved andre diagnostiske procedurer..

IgG-antistoffer bruges især til at diagnosticere Helicobacter pylori, en af ​​årsagerne til mavesår og gastritis..

IgA-antistoffer

De vises i serum 10-14 dage efter sygdommens begyndelse, og i starten kan de endda findes i sæd- og vaginalvæsker. IgA-antistofniveauer falder normalt med 2-4 måneder efter infektion, hvis behandlingen er vellykket. Efter reinfektion stiger niveauet af IgA-antistoffer igen. Hvis IgA-niveauet ikke falder efter behandlingen, er dette et tegn på en kronisk infektionsform.

Antistofanalyse i diagnosen TORCH-infektioner

Forkortelsen TORCH optrådte i 70'erne i det forrige århundrede og består af store bogstaver i de latinske navne på gruppen af ​​infektioner, hvor det kendetegnende er, at TORCH-infektioner under graviditet med relativ sikkerhed for børn og voksne er ekstremt farlige.

En blodprøve til TORCH-infektion er en omfattende undersøgelse, den inkluderer 8 test:

Ofte er infektion af en kvinde med TORCH-komplekse infektioner under graviditet (tilstedeværelsen af ​​kun IgM-antistoffer i blodet) en indikation for hendes afbrydelse.

Endelig

Nogle gange, når de finder IgG-antistoffer i analysen, for eksempel toksoplasmose eller herpes, får patienter panik og ser ikke på det faktum, at IgM-antistoffer, der viser tilstedeværelsen af ​​en aktuel infektion, helt kan være fraværende. I dette tilfælde indikerer analysen en tidligere infektion, hvortil immunitet har udviklet sig.

Under alle omstændigheder er det bedre at overlade fortolkningen af ​​analyseresultaterne til lægen og om nødvendigt med ham bestemme taktik for behandling. Og du kan stole på os til at tage prøver.

Hvorfor det er hurtigere, mere praktisk og mere rentabelt at tage prøver i Lab4U?

Du behøver ikke vente længe i receptionen

Al registrering og betaling af ordren sker online på 2 minutter.

Stien til det medicinske center tager ikke mere end 20 minutter

Vores netværk er det næststørste i Moskva, og vi er også i 23 byer i Rusland.

Kontrollens størrelse chokkerer dig ikke

En permanent 50% rabat gælder for de fleste af vores analyser..

Du behøver ikke at komme minut-i-minut eller vente i kø

Analyse indsendes ved optagelse i et passende tidsrum, for eksempel fra 19 til 20.

Du behøver ikke vente længe på resultaterne eller gå til laboratoriet for dem

Vi sender dem til e-mail. mail på beredskabstidspunktet.

Syphilis RPR (anticardiolipin test / udfældningsmikroreaktion), titer

Testen registrerer antistoffer mod cardiolipin (et lipid, der er en del af membranen af ​​mitokondrier og bakterier). Disse antistoffer er til stede i blodet hos patienter med syfilis..

Ikke-specifik antiphospholipid (reagin) test, en moderne analog til Wassermann-reaktionen (RW).

Nontreponemal test, hurtig plasma-reagin-test, syfilis-screeningstest, STS.

Hvilket biomateriale kan bruges til forskning?

Hvordan man forbereder sig til studiet?

• Ryg ikke i 30 minutter før undersøgelsen..

Undersøgelsesoversigt

Det forårsagende middel til syfilis er Treponema pallidum (bleg treponema), en bakterie fra spirochete-familien.

Syfilis er en seksuelt overført sygdom: oftest overføres den seksuelt. Derudover er infektion gennem blodet mulig (for eksempel ved at dele sprøjter, barbermaskiner osv.), Fosteret fra moderen eller gennem husholdningsruten (meget sjælden).

Den internationale klassificering af sygdomme skelner medfødt, tidlig og sen syfilis såvel som uspecificerede former. Den medicinske litteratur bruger begreberne primær, sekundær og tertiær syfilis.

Inkubationsperioden begynder fra infektionsøjeblikket og varer indtil de første symptomer (chancre) i gennemsnit 21 dage (fra 10 til 90 dage).

Primær syfilis er scenen fra begyndelsen af ​​hård chancre til udseendet af et udslæt. En solid chancre er en ømhed, der kan vises på det sted, hvor patogenet kom ind i kroppen (normalt på kønsorganerne). Det gør ikke ondt og forsvinder (uden behandling) efter 2-6 uger. Også på samme trin udvides undertiden lymfeknuder. Først forbliver en syg person seronegativ (dvs. der er endnu ingen antistoffer mod syfilis i hans blod).

Sekundær syfilis. Cirka 4-8 uger efter forekomsten af ​​chancre forekommer nye symptomer: udslæt og generel sygdom, feber, hovedpine osv. Mere alvorlige manifestationer er mulige..

Derefter forsvinder symptomerne på syfilis, og sygdommen går over i en latent fase. I dette tilfælde forlader patogenet stadig ikke kroppen, og med svækkelse af immunsystemet kan tilbagefald af sygdommen forekomme. Deres symptomer falder sammen med manifestationerne af sekundær syfilis.

Det sker, at syfilis forbliver i latent form. Men i nogle tilfælde, hvis en person ikke behandles, udvikles tertiær syfilis gennem årene. I dette tilfælde påvirkes forskellige organer og væv: nervesystemet og det kardiovaskulære system, knogler, led osv..

Serologiske tests (baseret på påvisning af antistoffer) bruges ofte til at diagnosticere syfilis. Alle typer analyser kan opdeles i to grupper: treponemale og ikke-reponemale tests. Syphilis RPR-analyse er ikke reponemal.

Treponemal-test afslører antistoffer rettet specifikt mod T. Pallidum-bakterier i sig selv, såsom RPHA-syfilis (passiv hæmagglutinationstest) eller RIF-syfilis (immunofluorescensreaktion).

Gennem ikke-reponemale tests påvises antistoffer mod cardiolipin (et lipid, der er en del af membranen fra mitokondrier og bakterier). De forekommer i den menneskelige krop fra stadiet med primær syfilis (ca. en uge efter forekomsten af ​​hård chancre). Med ikke-treponemal analysemetoder for syfilis skelnes antistoffetypen (IgG, IgM osv.) Ikke, men den totale respons bestemmes. Sådanne undersøgelser inkluderer nedbørsmikroreaktioner: RPR, VDRL osv..

Ved primær og sekundær syfilis er følsomheden ved ikke-reponemale tests høj (i tilfælde af RPR: 86% for primær, 100% for sekundær), og jo højere metodens følsomhed er, desto mere sandsynligt vil testen opdage sygdommen. Hvis en person er syg af syfilis, vil testresultatet med 100% følsomhed derfor helt sikkert være positivt.

Når man bruger ikke-repetitive prøver, er der imidlertid også et falsk-positivt resultat (påvisning af antistoffer, på trods af at personen ikke er syg af syfilis). Faktum er, at antistoffer mod cardiolipin ikke kun forekommer ved syfilis, men også med nogle andre sygdomme.

Derfor ved en diagnose af syfilis skal en ikke-reponemal test bekræftes ved hjælp af en mere specifik treponemal test..

Nontreponemal test har en anden funktion. Antistoffer mod cardiolipin forekommer i den akutte fase af sygdommen. Derfor, når en person kommer sig, falder deres niveau, så det kan bruges til at bedømme behandlings succes.

Hvad bruges undersøgelsen til??

• Til den primære diagnose af syfilis.
• At evaluere behandlingssucces.

Når en undersøgelse er planlagt?

• Ved screening for syfilis. Gravide kvinder, blodgivere (og organer), repræsentanter for visse erhverv (læger, ernæringsarbejdere, personer i kontakt med børn, patienter inden indlæggelse eller operation) bør undersøges.
• Hvis der er mistanke om syfilis (hvis patienten har symptomer på syfilis, kønsår eller andre kønsinfektioner, samt hvis hans seksuelle partner har syfilis). Især når et barn blev født af en mor med syfilis.
• Efter gennemgået behandling for syfilis.

Hvad betyder resultaterne??

Referenceværdier: negativ.

• Der er ingen syfilis. Imidlertid kan andre indstillinger ikke udelukkes fuldstændigt..

• • Syfilis på et tidligt tidspunkt. Hvis der er gået mindre end 3-5 uger siden infektionen, er antistoffer mod cardiolipin endnu ikke detekteret. Testen skal gentages efter 10-14 dage..
  • Syfilis på et sent tidspunkt. Efter fasen af ​​sekundær syfilis falder antallet af cardiolipin-antistoffer. F.eks. Er følsomheden af ​​VDLR-metoden for tertiær syfilis 70% (dvs. 30% af patienterne vil have et negativt resultat).
  • Falsk negativt resultat (i sjældne tilfælde). Der er en "prozoneffekt": hvis der er for mange antistoffer (for høj titer), kan resultatet være negativt.

Den endelige beslutning om diagnosen afhænger af resultatet af andre test (treponemal).

• Syfilis.
• Falsk positivt resultat. I dette tilfælde er antistof-titeren normalt meget lav..

Et positivt resultat skal bekræftes ved hjælp af specifikke treponemale tests..

Hvad betyder resultaterne af testen, der gentages (efter behandlingsforløbet)??

• Hvis resultatet blev negativt, eller titeren faldt med 4 gange eller mere - var behandlingen vellykket.

• Hvis titeren ikke er faldet - skal du konsultere en læge og yderligere undersøgelser.

Hvad kan påvirke resultatet?

Falske positive resultater kan være:

• med autoimmune lidelser (for eksempel med systemisk lupus erythematosus, thyroiditis),
• med spedalskhed, HIV-infektion, SARS, malaria osv..,
• hos mennesker, der injicerer stoffer,
• hos ældre.

Hvem ordinerer undersøgelsen?

Allmennpraktiserende læge, praktiserende læge, specialist i infektionssygdomme, venereolog.

Laboratoriemetoder til diagnose af syfilis

En syfilis-test er en af ​​de mest almindelige laboratorietest. Syfilis-test er vidt brugt i forebyggende undersøgelser. Ved hjælp af mikroskopi afsløres det forårsagende middel til syfilis - bleg treponema. Ved hjælp af serologiske reaktioner bekræftes diagnosen syfilis, diagnosen latent syfilis er fastlagt, behandlingseffektiviteten overvåges, helbredelse af patienter bestemmes.

Diagnosen syfilis etableres på basis af kliniske data, påvisning af syfilispatogener i prøverne af materialet og bekræftelse af diagnosen ved serologiske forskningsmetoder. Manifestationer af syfilis er mange og forskellige, hvorfor sygdommen opdages af læger med forskellige specialiteter. Differentialdiagnose af primær syfilis udføres med et antal sygdomme.

Fig. 1. På billedet er den primære manifestation af syfilis en hård chancre.

Antistoffer mod bleg treponema og serologisk diagnose

Når inficeret med syfilis dannes antistoffer i patientens krop. Serologisk diagnostik hjælper lægen med at undersøge dynamikken i dannelsen af ​​antistoffer i kroppen af ​​en patient med syfilis i de indledende stadier af sygdommen, under behandlingen og efter den, til at løse problemet med tilbagefald af patienten eller geninfektion (geninfektion), til at diagnosticere syfilis under massemedicinske tilstande.

Antistoffer mod bleg treponema IgM

De første IgM-antistoffer, der produceres efter infektion. De begynder at blive påvist ved serologiske reaktioner fra den anden uge efter infektion. Ved 6 - 9 ugers sygdom bliver antallet maksimalt. Hvis patienten ikke er blevet behandlet, forsvinder antistofferne efter seks måneder. IgM-antistoffer forsvinder efter 1 - 2 måneder. efter behandling af tidlig syfilis, efter 3 - 6 måneder. - efter behandling af sen syfilis. Hvis deres vækst registreres, er dette et tegn på gentagelse af syfilis eller indikerer geninfektion. IgM-molekyler er store og krydser ikke morkagen til fosteret.

IgG Treponema antistoffer

Antistoffer IgG-immunglobuliner vises ved udgangen af ​​den første måned (den 4. uge) fra infektionsøjeblikket. Deres titre er højere end IgM-titeren. IgG vedvarer efter helbredelse i tilstrækkelig lang tid.

Ikke-specifikke antistoffer

Der er mange serologiske reaktioner. Dette skyldes den antigene mangfoldighed af lys treponemas. I blodserumet hos en syg person i forskellige syfilisstadier, ud over specifikke, dannes et eller andet ikke-specifikt antistof - agglutininer, komplementbindere, immobiliziner, antistoffer, der forårsager immunfluorescens, præcipitiner osv. Serologiske reaktioner til at detektere ikke-specifikke antistoffer har derfor relativ specificitet, derfor for at undgå diagnostiske fejl, bør ikke bruge en, men et kompleks af serologiske reaktioner (DAC).

Falske positive tests for syfilis

Et karakteristisk træk ved ikke-reponemale tests er modtagelsen af ​​falske positive reaktioner. Reagin-antistoffer, der produceres i en persons blod mod et cardiolipin-antigen, registreres ikke kun for syfilis, men også for andre sygdomme: kollagenoser, hepatitis, nyresygdomme, thyrotoksikose, onkologiske sygdomme og infektionssygdomme (spedalskhed, tuberkulose, brucellose, malaria, sirup,, skarlagensfeber), under graviditet og månedlige cykler, når man tager fedtholdige fødevarer og alkohol. Det bemærkes, at med alderen stiger antallet af falske positive reaktioner..

Fig. 2. På billedet, primær syfilis hos kvinder.

Laboratoriediagnostik af syfilis ved hjælp af serologiske reaktioner

Serologiske tests for syfilis er opdelt i treponemal og ikke-reponemal.

1. Ikke-gentagne prøver

Cardiolipin-antigen anvendes som et antigen i denne gruppe af test. Lipidantigenerne fra syfilis patogener er de mest talrige. De udgør 1/3 af den tørre cellemasse. Ved anvendelse af ikke-treponemale tests detekteres reagin antistoffer, der produceres mod cardiolipin-antigenet. Denne gruppe inkluderer komplementbindingsreaktionen (RSCcard), mikropræcipitationsreaktionen (RMP), reaktionen med hurtig bestemmelse af plasmareager (RPR) osv. Ved anvendelse af ikke-reponemal test udføres primær screening for syfilis (undersøgelse af populationsgrupper) og muligheden for at opnå resultater i kvantitativ form giver dig mulighed for at bruge disse test til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen. Positive resultater af ikke-reponemale tests skal bekræftes ved treponemale tests. Et karakteristisk træk ved ikke-reponemale tests er modtagelsen af ​​falske positive reaktioner..

2. Treponemal-test

Treponemal-test bruger treponemal antigener isoleret fra en bleg treponemal kultur. Med deres hjælp bekræftes de positive resultater af ikke-repemal-test. Gruppen inkluderer: RSKstrep - komplementfixeringsreaktion, RIF - immunofluorescensreaktion og dens modifikationer, RIT, RIBT - blek treponemal immobiliseringsreaktion, RPHA - passiv hæmagglutineringsreaktion, ELISA - enzymimmunoassay.

3. Tests for syfilis under anvendelse af rekombinante antigener

Antigener til denne gruppe af tests opnås ved genteknologi og anvendes i reaktionerne - RPHA og ELISA, i analysen af ​​immunblotting (IB) og immunokromatografisk analyse.

Fig. 3. Et kompleks af serologiske test bruges til at diagnosticere syfilis..

Diagnose af syfilis ved hjælp af ikke-reponemale tests

For at påvise syfilis anvendes ikke-reponemale tests eller et kompleks af serologiske reaktioner (CSR). Serologisk diagnostik vil blive brugt fra den 5. uge fra infektionsøjeblikket eller fra 2-3 uger efter udseendet af en fast chancre. Antistoffer påvises i næsten alle patienter med frisk primær, sekundær og tilbagevendende syfilis. Serologiske reaktioner er positive hos 70 - 80% af patienter med tertiær aktiv syfilis, i 50 - 60% af tilfældene hos patienter med tertiær latent syfilis.

Serologiske reaktioner ved anvendelse af ikke-reponemale tests kan give falske positive resultater..

Fig. 4. Blodprøvetagning for syfilis.

Komplementær bindende reaktion (CSC-kort, KSK med KA, Wasserman-reaktion)

Wasserman-reaktionen (RW, RV), opfundet af A. Wasserman for mere end 100 år siden, har gennemgået mange ændringer i dag, men som en hyldest til traditionen har den bevaret sit navn til nutiden. Den komplementbindende reaktion med anvendelse af cardiolipin-antigen er ikke kun beregnet til at detektere antistoffer, men udføres også i en kvantitativ version - med forskellige fortyndinger af serum, som gør det muligt at bruge det til at overvåge behandlingseffektiviteten. Lav følsomhed og specificitet, opnåelse af falsk-positive resultater er de negative aspekter af denne type undersøgelse.

Essensen af ​​Wassermann-reaktionen er som følger: antigenerne, der bruges i formuleringen af ​​Wasserman-reaktionen, i nærværelse af antistoffer mod syfilis-patogener i en persons blod, binder til dem gennem et kompliment og præcipiterer. Reaktionens intensitet er angivet med tegnet (+). Reaktionen kan være negativ (-) - mangel på bundfald, tvivlsom (lille bundfald eller +), svagt positiv (++), positiv (+++) og skarpt positiv (++++).

Mere følsom er den modificerede Wassermann-reaktion - Colmer-reaktionen. Med sin hjælp detekteres antistoffer i sera, hvor Wasserman-reaktionen gav et negativt resultat..

Ved kraftigt positive reaktioner udføres en kvantitativ bestemmelse af reagenser, til hvilke serum anvendes i fortyndinger fra 1:10 til 1: 320, hvilket tillader, at denne type undersøgelse anvendes til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen. For eksempel indikerer et fald i antistoftiter og deres efterfølgende seronegivering (opnåelse af negative resultater) en vellykket helbredelse af sygdommen.

Fig. 5. Blodprøve for syfilis - Wasserman-reaktion.

Udfældningsmikroreaktion (MCI)

Udfældningsmikroreaktion anvendes til masseundersøgelser af visse grupper af befolkningen, diagnose af syfilis og overvågning af effektiviteten af ​​behandlingen. For at udføre denne type forskning kræves en lille mængde af det studerede materiale. Udfældningsmikroreaktion er baseret på den immunologiske antigen-antistofreaktion. I tilfælde af antistoffer i individets blodserum udfældes antigen-antistofkomplekset med dannelse af flager. Reaktionen udføres i hullerne på en speciel glasplade. Det estimeres af intensiteten af ​​bundfaldet og størrelsen af ​​flagerne i (+) som Wassermann-reaktionen. Når man undersøger gravide kvinder, anvendes donorer og til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen. VDRL og RPR er sorter af mikroreaktioner.

Fig. 6. Type nedbørsreaktion i et dråbe på glas.

Fig. 7. Blodprøve for syfilis - en mikroudfældningsreaktion.

Fig. 8. Indstil til udførelse af reaktionen med henblik på hurtig bestemmelse af plasmareagenser (Test for syfilis RPR).

Alle positive test opnået under ikke-specifikke serologiske reaktioner kræver bekræftelse ved specifikke reaktioner - treponemale tests.

Diagnose af syfilis ved hjælp af treponemale tests

Ved udførelse af treponemal test anvendes antigener af treponemal oprindelse. Deres negative side er manglende evne til at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen, for at opnå positive resultater for spirochetosis og ikke-veneriske treponematoser og til at opnå falske positive resultater i kræft, spedalskhed og nogle endokrine patologier. Tests som RPHA, ELISA og RIF forbliver positive i mange år efter hærdning af syfilis og i nogle tilfælde for livet.

RIBT og RIF er de mere specifikke for alle serologiske reaktioner, der bruges til at diagnosticere syfilis. De gør det muligt at skelne falske positive reaktioner, at identificere sene former for syfilis, der opstår med negative reaktioner. Ved hjælp af RIBT genkendes falske positive reaktioner hos gravide kvinder, når det er nødvendigt at løse spørgsmålet om infektion af barnet.

Immobilisering af lys treponemas (RIBT, RIT)

Essensen af ​​reaktionen er, at antistoffer i patientens blodserum immobiliserer lys treponemas. En reaktion betragtes som negativ ved immobilisering af op til 20% patogener, svagt positive - 21 - 50%, positive - 50 - 100%. RIBT giver undertiden falske positive resultater. Testen er kompleks og tidskrævende, men er uundværlig ved den differentielle diagnose af latente former for sygdommen og falsk-positive resultater af serologiske reaktioner, inklusive hos gravide kvinder. RIBT giver et 100% positivt resultat med sekundær, tidlig og sen syfilis, i 94 - 100% af tilfældene med andre former for syfilis.

Immunofluorescensreaktion (RIF)

Essensen af ​​reaktionen er, at lys treponemas (antigener) forbundet med antistoffer mærket med fluorokromer udsender en gulgrøn glød i et selvlysende mikroskop. Resultatet evalueres med et plustegn (+). Ved anvendelse af RIF detekteres klasse A. immunoglobuliner. Immunfluorescensreaktionen bliver positiv tidligere end Wasserman-reaktionen. Det er altid positivt med sekundær og latent syfilis, i 95 - 100% af tilfældene positivt med tertiær og medfødt syfilis. Teknikken til at udføre denne type undersøgelse er enklere end RIBT, men det er umuligt at erstatte RIF med RIBT, da denne reaktion er underordnet RIBT i specificitet. RIF-10 (RIF-modifikation) er mere følsom, RIF-200 og RIF-abs er mere specifikke.

Fig. 9. Blodprøve for syfilis - immunofluorescensreaktion (RIF).

Immun vedhæftning af bleg Treponema (RIPBT)

Essensen af ​​reaktionen er, at bleg treponema, der er sensibiliseret af patientens serum, klæber til overfladen af ​​røde blodlegemer i nærvær af komplement. De resulterende komplekser under centrifugering udfældes. Denne tests følsomhed og specificitet er tæt på RIF og RIBT.

Enzymbundet immunosorbent assay for syfilis (ELISA)

Under anvendelse af ELISA bestemmes immunoglobuliner i klasse M og G. IgM - ELISA kan bruges som screenings- og bekræftelsestest. Følsomheden af ​​ELISA og dens specificitet ligner RIF. Med syfilis giver IFA positive resultater fra den tredje infektionsmåned og i lang tid (sommetider hele livet) forbliver positive.

Fig. 10. Enzymimmunanalyse.

Passiv (indirekte) hæmagglutineringsreaktion (RPHA)

RPHA er baseret på evnen hos røde blodlegemer, på hvilke antigener af bleg treponema adsorberes, til at klæbe sammen i nærværelse af patientens serum (hæmagglutination). RPGA bruges til at diagnosticere alle former for syfilis, inklusive latent. Ved anvendelse af antigen af ​​høj kvalitet overskrider denne type serologiske reaktioner alle andre test for specificitet og følsomhed..

Fig. 11. RPGA bruges til at diagnosticere alle former for syfilis.

Fig. 12. Analyse for syfilis - en reaktion af passiv (indirekte) hæmagglutination (skema).

Fig. 13. Udsigten over den omvendte paraply, der optager hele bunden af ​​røret, indikerer en positiv reaktion. I det tilfælde, hvor røde blodlegemer sætter sig i en søjle ("knap") i midten af ​​bunden af ​​røret, indikerer de en negativ reaktion.

Fig. 14. Laboratorie RPHA-test.

Mikrobiologisk diagnose

Sammen med serologisk diagnostik spiller metoden til påvisning af bleke treponemas (mikrobiologisk diagnostik) en vigtig rolle, især under seronegativ syfilis, når antistoffer stadig mangler i blodet, men der er allerede de første manifestationer af frisk primær syfilis (hård chancre).

Det biologiske materiale til undersøgelsen er udflod fra overfladen af ​​faste mavesår (chancres), indholdet af pustulær syfilis, grædende og erosive papler, punktat af inficerede lymfeknuder, cerebrospinalvæske og fostervand, til PCR - blod.

Den bedste metode til påvisning af syfilispatogener er at studere biologisk materiale i et mørkt felt i et mikroskop. Denne teknik giver dig mulighed for at se bleg treponema i en levende tilstand, til at undersøge dens strukturelle træk og bevægelser, for at skelne patogene patogener fra saprofytter.

Fig. 15. Syfilisanalyse - mikroskopi af mørk felt.

Fig. 16. Når man studerer tørt udstryg, anvendes Romanovsky-Giemsa-plet. Samtidig bliver lys treponemas lyserød, alle andre typer spirocheter bliver lilla.

Påvisning af bleke treponemas under mikroskopi i et mørkt felt er et absolut kriterium for den endelige diagnose af syfilis.

Fig. 17. For at påvise bakterier anvendes en immunofluorescensreaktion (RIF) - treponemal test. Et specifikt antigen-antistofkompleks, når det kombineres med et specifikt serum mærket med en fluorokrom, i lyset af et selvlysende mikroskop giver bakterier en glød af grønlig farve.

Fig. 18. De årsagsmæssige virkninger af syfilis er tydeligt synlige i udstrygninger, der er fremstillet efter Levaditi-teknikken (imprægnering med sølv). Bleg treponemas af en mørk farve på baggrund af gul farvning af celler i inficeret væv.

Fig. 19. Det forårsagende middel af syfilis med en gentagne stigning.

Fig. 20. Billedet viser en koloni med lyse treponemer. Det er svært at få en bakteriekultur. De vokser praktisk talt ikke på kunstige næringsmedier. På medier, der indeholder hest- og kaninserum, vises kolonier på dagene 3 til 9.

PCR til syfilis

En effektiv og lovende i dag er metoden til polymerasekædereaktion. PCR for syfilis giver dig mulighed for at få resultatet inden for et par timer, og i det mindste flere patogener kan være til stede i det materiale, der er indsamlet til diagnose.

Fig. 21. PCR for syfilis giver dig mulighed for at registrere DNA eller dets fragmenter af bleg treponemas.

Følsomheden af ​​denne forskningsmetode afhænger af tilstedeværelsen af ​​bleg treponemas i det biologiske materiale og når 98,6%. Specificiteten af ​​denne test afhænger i vid udstrækning af det korrekte valg af målet for amplifikation under diagnosen og når 100%.

På grund af de utilstrækkeligt studerede komparative karakteristika for følsomheden og specificiteten af ​​direkte metoder til diagnosticering af syfilis og PCR, er denne metode til undersøgelse i Den Russiske Føderation for diagnosticering af sygdommen endnu ikke tilladt.

PCR til syfilis må kun udføres i nogle tilfælde som en yderligere metode til diagnose af medfødt syfilis, neurosyphilis, med vanskeligheder med at diagnosticere syfilis ved hjælp af serologiske forskningsmetoder hos HIV-patienter.

Fig. 22. Påvisning af bleg treponema-DNA ved anvendelse af PCR indikerer enten tilstedeværelsen af ​​levedygtige bakterier eller rester af de døde, men indeholder evne til at danne yderligere kopier af individuelle sektioner af kromosomalt DNA.